Analizador de inmunoensayo de fluorescencia

El inmunoensayo de polarización de fluorescencia (FPIA) es una clase de prueba bioquímica in vitro utilizada para la detección rápida de anticuerpos o antígenos en la muestra. FPIA es un ensayo homogéneo competitivo, que consiste en un método simple de preparación y lectura, sin el requisito de separación o pasos de lavado.

La base del ensayo es la anisotropía de fluorescencia, también conocida como polarización de fluorescencia. Si una molécula fluorescente es estacionaria y está expuesta a la luz polarizada en el plano, se excitará y, en consecuencia, emitirá radiación de regreso al plano polarizado. Sin embargo, si la molécula fluorescente excitada está en movimiento (rotacional o traslacional) durante la vida útil fluorescente, emitirá luz en una dirección diferente al plano de excitación. La vida útil fluorescente es la cantidad de tiempo entre el momento de absorción y el momento de emisión fluorescente.

Por lo general, la velocidad a la que gira una molécula es indicativa de su tamaño. [1] Cuando una molécula marcada con fluorescencia (marcador) se une a otra molécula, el movimiento de rotación cambiará, dando como resultado una intensidad alterada de la luz polarizada en el plano, lo que da como resultado una polarización de fluorescencia alterada. [2] Los inmunoensayos de polarización de fluorescencia emplean un antígeno unido a fluoróforo que cuando se une al anticuerpo de interés, aumentará la polarización de fluorescencia. El cambio en la polarización es proporcional a la cantidad de antígeno en la muestra, y se mide con un analizador de polarización de fluorescencia. [3]